Gene Fragment Service
Service 소개
- Gene Fragments 합성 가능 길이 : 100-3,000 bp
- Linear fragment의 double strand DNA type으로 제공 (Not plasmid type)
- Sequence 100% 검증 제품을 원하시면 plasmid type의 gene 합성 제품 권장
- Amount : Cloning 및 qPCR control들의 실험에 충분한 양으로 fragment gene 제공
- 원하는 vector에 사용자가 직접 cloning 가능
- A, T, C or G residues only
- High fidelity gene fragment 제공
Fragment gene libraries
- Available in lengths of 1,500 bp
- Library Type : NNK/NNS/NNN combinatorial library or Trimer-controlled combinatorial library
- Delivered dry, minimalize to 50 ng
- 약 3-4 주 소요
Sequence 검증
- 합성 완료된 Fragment gene을 직접 cloning 했을 때 약 85% 이상의 colony에서 정확한 sequence의 inser 확인이 가능했습니다. 복잡한 구조의 sequence는 fidelity가 감소될 수도 있으며 이런 경우에는 clone을 추가로 확보하여 sequencing을 해 보셔야 합니다.
- 모든 주문은 합성 전문가에게서 바이오 안정성 검사를 거칩니다.
- 바이러스나 유해 물질을 coding 하는 경우에는 해외 정부의 수출 허가를 받아야 합니다.
합성 가능한 수식 종류
- 5' Phosphorylation (추가 비용 발생)
- A/T/C/G DNA bases만 가능
- 기타 수식 합성 또는 변형 base 추가 불가
Gene Fragment를 이용한 아주 간편한 cloning applications 방법들
-
사용 방법 주문 방법 To blunt clone into a vector 5' phosphates 수식합성 추가하여 주문 To clone with restriction sites 5' phosphates는 없애고 제한효소 사이트를 gBlock의 양 말단에 추가하여 주문 To clone with the isothermal method 5' phosphates는 없애고 Nature paper의 protocol를 따라 실험 To clone with T/A cloning 5' phosphates 수식합성 추가하여 주문 (단, TOPO cloning kits from Life technologies 또는 the StrataClone kit from Agilent Technologies는 제외).
각 제조사의 protocol 참조
Synthesis Period
-
Gene Fragments 소요기간 (weeks) Yield (ng) 100 ~ 500 bp 2~3 500 501 ~ 750 bp 2~3 500 751 ~ 1,000 bp 2~3 1,000 1,001 ~ 1,250 bp 2~3 1,000 1,251 ~ 1,500 bp 2~3 1,000 1,501 ~ 1,750 bp 2~3 1,000 1,751 ~ 2,000 bp 2~3 1,000 2,001 ~ 2,250 bp 3~4 1,000 2,251 ~ 2,500 bp 3~4 1,000 2,501 ~ 2,750 bp 3~4 1,000 2,751 ~ 3,000 bp 3~4 1,000