서비스 종류
- Bacterial Expression
- Mammalian Cell Expression
- Baculovirus Expression
- Yeast Expression
Bacterial Expression
Bacterial expression (E.coli) 시스템은 경제성, 기간, 생산량에 있어 여타 시스템과의 비교우위에서 가장 일반적으로 사용되고 있는 재조합 단백질 생산시스템입니다. 현재까지 다양한 vector, host, fusion partner, soluble expression, refolding 방법들이 개발되었으며 최근에는 codon을 E.coli에
적합하게 변형한 재조합 유전자를 합성하여 생산량을 개선하는 방법도 사용되고 있습니다.
코스모진텍에서는 E.coli에서 재조합 단백질 생산을 위한 vector
구축부터 발현 최적화 및 정제까지 일련의 서비스를 체계적인 과정을 통해 제공해 드립니다.
서비스 내용
Expression optimization
- Host : Vector system에 적합한 E.coli host 제안
- IPTG concentration : 2 points (0.2 mM, 1 mM)
- Temperature & time : 3 points (18℃ 16 hr, 26℃ 6 hr, 37℃ 4 hr)
- Solubility test
Scale-up & purification
- 1 L scale culture
- Affinity purification (His, GST, MBP tag) with FPLC (GE healthcare)
- Dialyzed into desired storage buffer
- Quantification by Bradford assay
Affinity tag removal
- Affinity tag과 target protein 사이의 proteinase site cleavage
- Endoprotease : Thrombin, Enterokinase, Factor Xa, TEV protease
Refolding
- Inclusion body purification
- Denaturing affinity chromatography
- On-Column refolding
활용 분야
- Protein functional study
- Protein in vitro binding assay
- Enzyme preparation
- Antigen preparation for antibody generation
- Standard antigen for immunoassay
