서비스 종류
- Bacterial Expression
- Mammalian Cell Expression
- Baculovirus Expression
- Yeast Expression
서비스 개요
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- Bacterial expression (E.coli) 시스템은 경제성, 기간 및 생산량에 있어서 여타의 시스템에 비해 비교우위에 있어서 아직까지도 가장 일반적으로 사용되고 있는 재조합 단백질 생산시스템입니다. 현재까지 다양한 vector, host, fusion partner, soluble expression 방법 및 refolding 방법들이 개발되어 왔고, 최근에는 codon을 E.coli에 적합하게 변형한 재조합 유전자를 합성하여 생산량을 개선하는 방법도 사용되고 있습니다. 코스모진텍에서는 E.coli에서 재조합 단백질 생산을 위한 vector 구축에서부터 발현 최적화 및 정제까지 일련의 체계적인 서비스를 제공해 드립니다.
서비스 내용
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- - Expression optimization
- Host : Vector system에 적합한 E.coli host 제안
- IPTG concentration : 2 points (0.2 mM, 1 mM)
- Temperature & time : 3 points (18℃ 16 hr, 26℃ 6 hr, 37℃ 4 hr)
- Solubility test
- - Scale-up & purification
- 1 L scale culture
- Affinity purification (His, GST, MBP tag) with FPLC (GE healthcare)
- Dialyzed into desired storage buffer
- Quantification by Bradford assay
- - Affinity tag removal
- Affinity tag과 target protein 사이의 proteinase site cleavage
- Endoprotease : Thrombin, Enterokinase, Factor Xa, TEV protease
- - Refolding
- Inclusion body purification
- Denaturing affinity chromatography
- On-Column refolding
활용 분야
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- - Protein functional study
- - Protein in vitro binding assay
- - Enzyme preparation
- - Antigen preparation for antibody generation
- - Standard antigen for immunoassay
- 저희 코스모진텍은 ELISA kit, antibody, recombinant protein 생산 및 공급 전문업체인 CUSABIO을 통해 high quality protein expression service를 제공해드립니다.
서비스 개요
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- Mammalian cell에서의 단백질 발현은 다른 진핵생물의 발현시스템에 비해 folding, glycosylation, sulfation등의 단백질 번역 후 가공과정이 이루어지므로 원래의 형태와 유사한 단백질을 얻을 수 있습니다.
서비스 내용
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- - Plasmid construction
- Gene synthesis & sub-cloning (optional)
- - Small scale expression
- Multi-condition expression scheme
: small scale에서 확인된 condition을 토대로
scale up expression 진행
- - Additional services (optional)
- Tag removal (비용 발생)
- Filter-sterilization, Endotoxin removal, Lyophilization (무료)
- - Quality control
- Product data sheet & COA 제공
서비스 장점
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- - Non-self endotoxin
- - Secretion expression 가능
- - 분자 구조, 물리적, 화학적 특성 및 생물학적 기능에서 native protein과 유사
- - 다양한 cell lines과 발현 방법 : 높은 성공률과 발현률 증가
- - 영업일 기준 최소 40일 소요
활용 분야
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- - Complex higher eukaryotes proteins
- 저희 코스모진텍은 ELISA kit, antibody, recombinant protein 생산 및 공급 전문업체인 CUSABIO을 통해 high quality protein expression service를 제공해드립니다.
서비스 개요
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- 높은 안전성이 장점인 진핵 발현 시스템입니다. 높은 분자량의 단백질을 동시에 발현시킬 수 있으며, 단백질 발현 후 가공과정으로 인하여 원래의 형태와 유사한 단백질을 얻을 수 있습니다. Transfer vector, baculovirus vector 및 host cell로 구성되며 바이러스 백신 개발 (ex - 인플루엔자 백신, HPV 백신, 세포 신호 전달 단백질 및 cytokine, kinase 개발) 등에 사용됩니다.
서비스 내용
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- - Plasmid construction
- Gene synthesis & sub-cloning (optional)
- - Preparation of recombinant Bacmid and high titer virus
- Recombinant Bacmid 확보를 위한 DH10Bac cell transformation
- - Scale up expression & purification
- Baculovirus를 얻기 위해 Insect cell에 recombinant Bacmid DNA transfection
- - Additional services (optional)
- Tag removal (비용 발생)
- Filter-sterilization, Endotoxin removal, Lyophilization (무료)
서비스 장점
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- - Large gene fragment 운반 능력으로 large protein 발현 가능
- - 높은 안전성 : Baculovirus는 엄격한 종 특이성으로 활성이 제한적
- - Post-translational modification을 통해 높은 생물활성을 가진 단백질을 효율적으로 발현
- - Unique bacmid based expression system : 기존 방식보다 낮은 가격, 대용량 suspension transfection, 높은 titer
- - 영업일 기준 최소 40일 소요
활용 분야
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- - Virus vaccines
- - Signal proteins
- - Cytokines, kinases, etc
- 저희 코스모진텍은 ELISA kit, antibody, recombinant protein 생산 및 공급 전문업체인 CUSABIO을 통해 high quality protein expression service를 제공해드립니다.
서비스 개요
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- 분비 발현 및 세포내 발현이 모두 가능한 매우 효과적인 진핵세포 발현 모델 시스템입니다. 원핵생물 발현 단백질보다 안정적으로 고순도 단백질을 얻을 수 있으며, 특히 진핵생물 유전자의 발현 및 기능성 단백질을 얻는데 유용합니다.
서비스 내용
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- - Expression vector construction
- Gene synthesis & sub-cloning (optional)
- - Transformation & strain identification
- Prepare the recombinant plasmid in large quantities
- Linearization of recombinant plasmid
- Transform to appropriate host
- - Small test, scale up expression & purification
- Small scale expression screening (20-40 strains)
- Strain 결정 및 발현 조건 최적화
- Scale up & purification
- - Additional services (optional)
- Tag removal (비용 발생)
- Filter-sterilization, Endotoxin removal, Lyophilization (무료)
- - Quality control
- Product data sheet & COA 제공
서비스 장점
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- - Non-Self endotoxin
- - 저렴한 비용, 높은 발현 효율
- - Prokaryotic proteins보다 안정적이며, 특히 tuberculosis proteins, defensin, interleukin 및 cytokines과 같은 functional proteins의 발현 및 제조에 안정적
- - Unique PickRight technology : Transformation 후 screening 없이 높은 발현 수준의 strain을 바로 획득 가능 (기존 screening 방식에 비해 소요기간 5~10일 감소)
- - 영업일 기준 최소 40일 소요
활용 분야
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- - Industrial strain improvement, amplification